揮發性鹽基氮(TVB-N)動物性食品由于酶和細菌的作用,在過程中,使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發性,其含量越,表明氨基酸被破壞的越多,別是蛋氨酸和酪氨酸,因此營養價值大受影響。
?揮發性鹽基氮(TVB-N)動物性食品由于酶和細菌的作用,過程中,使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發性,其含量越,表明氨基酸被破壞的越多,別是蛋氨酸和酪氨酸,因此營養價值大受影響。
揮發性鹽基氮(TVB-N)的測定
1. 半微量定氮法
(1)原理:蛋白質在酶和細菌的作用下分解后產生堿性含氮物質,有氨、伯胺、仲胺等,此類物質具有揮發性,可在堿性溶液中被蒸餾出來,用標準酸滴定,計算含量。
(2)試劑
①氧化鎂混懸液 ②2%硼酸溶液(吸收液) ③0.2%甲基紅乙醇液 ④0.1%亞甲藍水溶液
臨用時將③④等量混合為混合示液 ⑤0.0100N鹽酸標準溶液或0.0100N 硫酸標準溶液
(3)儀器
①半微量定氮裝置:Markhan氏式 ②微量滴定管:zui小分度0.01ml
(4)操作方法
①樣液的制備:將樣品除去脂肪、骨頭及筋腱后,切碎攪勻,稱取10g于錐形瓶中,加100ml水,不時振搖,浸漬30min后過濾,濾液置于冰箱中備用。
②測定:預將盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合示液的錐形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入錐形瓶內吸收的液面下,吸取5ml上述樣品濾液于蒸餾器反應室內,加5ml 1%氧化鎂混懸液,迅速蓋塞,并加水以防漏氣,通入蒸汽,待蒸汽充滿蒸餾器內時即關閉蒸汽出口管,由冷并行管出現*滴冷凝水開始計時,蒸餾5min即停止,吸收液用0.0100N鹽酸標準溶液或0.0100N硫酸標準溶液滴定,終點呈藍紫色。同時做試劑試驗。
(5)計算
(V1-V2)×N1×14
X1= ------------------------- ×100
m1×5/100
式中:X1--樣品中揮發性鹽基氮的含量,mg/100g
V1--測定用樣液消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積,ml
V2--試劑消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積,ml
N1--鹽酸或硫酸標準溶液的摩爾濃度,mol/L
m1--樣量,g
14--1N鹽酸或硫酸標準溶液1ml相當氮的毫克數
2. 微量擴散法
(1)原理:揮發性含氮物質在堿性溶液中釋出,在擴散皿中于37℃時揮發后吸收于吸收液中,用標準酸滴定,計算含量。
(2)試劑
①飽和碳酸鉀溶液:稱取50g碳酸鉀,加50ml水,微加熱助溶,使用時取上清液。
②水溶性膠:稱取10g阿拉伯膠,加10ml水,再加5ml甘油及5g無水碳酸鉀(或無水碳酸鈉),研勻。
③吸收液:混合示液、0.0100N鹽酸或硫酸標準溶液,與半微量定氮法相同。
(3)儀器
①擴散皿(標準型):玻璃質,內外室總直徑61mm,內室直徑35mm;外室深度10mm,內室深度5mm;外室壁存3mm,內室壁存2.5mm,回壁紗厚玻璃蓋,如圖1-1所示,其他型號亦可用。
②微量滴定管:zui小分度0.01ml。
①將水溶性膠涂于擴散皿的邊緣,在皿中央內室加入1ml吸收液及1滴混合示液。在皿外室側加入1.00ml按半微量定氮法制備的樣液,另側加入1ml飽和碳酸鉀溶液,注意勿使兩滴接觸,立即蓋好;密封后將皿于桌面上輕輕轉動,使樣液與堿液混合。
②將擴散皿置于37℃溫箱內放置2h,揭去蓋,用0.01N鹽酸標準溶液或硫酸標準溶液滴定,終點呈藍紫色。同時做試劑試驗。
圖1-1 微量擴散皿(標準型)
①加碳酸鉀時應小心加入,不可濺入內室。
②擴散皿應潔凈、干燥,不帶酸堿性。
③檢樣測定與試驗均需各作2份平行試驗。
④計算
(V3-V4)×N1×14
X2= ------------------------- ×100
m1×100/5
式中:X2--樣品中揮發性鹽基氮的含量,mg/100g
V3--測定用樣液消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積,ml
V4--試劑消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積,ml
N1--鹽酸或硫酸標準溶液的摩爾濃度,mol/L
m1--樣量,g
14--1N鹽酸或硫酸標準溶液1ml相當氮的毫克數
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